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实验室新冠病毒流式标本处理的4大注意事项!
点击次数:981 发布时间:2020-02-25

在进入正题之前,杰懋小编有话说:

自2019年12月以来,新型冠性病毒已经疯狂施虐了我们2个月的时间,这场无声的硝烟比我们想象中的要来得激烈,这场战争比我们想象中要更持久,经过千千万万位白衣天使的努力和付出,经过广大民众以及社工人员的坚持和努力,疫情总算在一点一点得到控制。

然而,在最近两天,网上突然铺天盖地般地出现了人群开始松懈、摘掉口罩聚集的消息,这是一件多么可怕的事情!截止2020年2月23号,钟南山战士称当前疫情仍然严峻,目前已达到最吃劲的时候,所以,希望广大民众在安全响应解除之前都别掉以轻心,否则白衣天使的夜以继日的拼命就白费了,之前足不出户的坚持都白费了!

国家卫健委批准,1月25日发布的《北京协和医院关于“新型冠状病毒感染的肺炎”诊疗建议方案(V2.0)》第二条“2019-nCoV病人的诊疗-诊断标准中提到:对于急性发热对于急性发热(72h内,体温大于37.5度)且肺部影像学正常者,若外周血淋巴细胞绝对值小于0.8×109/L,或出现CD4及CD8 T细胞计数明显下降者,即使核酸检测未呈现阳性,均应居家隔离密切观察。病人常规检查中提到:1、筛查病例,就诊当日可酌情查炎症因子(IL-6,IL-10,TNF-α)、TB亚群11项.2、确诊病人序贯检查,第5-7天若有条件可复查TB淋巴细胞亚群11项。

因为免疫受到临床的重视,许多新冠病人的定点医院都开展了流式的检测。对于流式工作的老师,除了结果的准确及解读以外,也需要关注生物安全的防护。

下面就整理的流式样本处理过程中一些注意事项,献给我们的流式工作者们。

01样本加样:

建议在生物安全柜进行实验操作,如有液体溅出,用浸湿75%酒精的纱布覆盖后擦拭。个人按照3级生物安全进行防护。

2019-nCov 生物安全防护措施:

 一级生物安全防护:医用外科口罩、乳胶手套、工作服、医用防护帽,加手卫生

 二级生物安全防护:医用防护口罩或N95口罩、乳胶手套、工作服、外隔离衣、医用防护帽,加手卫生,酌情可加护目镜。

 三级生物安全防护:医用防护口罩或N95、双层乳胶手套、面屏、护目镜、工作服外防护服、双层医用防护帽,加手卫生、必要时双层口罩(外医用防护口罩,内N95)。

02溶血及固定:

根据卫生部2011年发布的《流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南》,尽量使用含固定剂的溶血素可以达到灭活病毒的作用。

如使用其他不带固定剂成分的溶血素如氯化铵,也可以配制0.1%-2.0%的多聚甲醛或甲醛,或者稀释好的细胞保存液在溶血时一起加入,并且放置30min,可以达到灭活病毒的作用。

03混匀、离心等步骤防护:

灭活前的样品处理步骤,须严格按照三级防护,谨防气溶胶污染,例如:

 使用带生物安全密封盖或密封杯的离心机进行离心(如德国NACHT纳赫特高速冷冻离心机NACHTC-30R配套的透明密封杯系列),样品管/流式管优选带密封盖离心,不使用自动脱帽离心功能;

 即使室温离心,也选用密封更良好的制冷型离心机(如德国NACHT纳赫特NACHTC-30R),并置于负压抽风区域;

 离心后静置10-30分钟再开盖,仔细观察样品无泄漏后,再把透明密封杯移至生物安全柜再开盖取样。

04仪器的清洗及维护:

如有样本的洒溢,请用浸湿75%酒精的纱布覆盖30min后擦拭,包括样本进样针。

流式细胞仪的废液桶中需要装有占其体积 1/10的0.71mol/L次氯酸钠 (未稀 释的家用漂白剂)。 实验室设备应该用具有灭活传染源作用的溶液或新配制的 10%家用漂白剂消毒 ,尤其在设备维修和保养前给予严格消毒。

在这紧要的关头,奋战在一线的战士希望你们平安健康,还未可出门的朋友希望你们继续坚持一下,已经复工的小伙伴们希望你们千万注意防护和安全,待到疫情结束,我们再去武汉看樱花,再看祖国这大好山河的春意盎然。

参考资料:

1. 《北京协和医院关于“新型冠状病毒感染的肺炎”诊疗建议方案(V2.0)》

2. 2019新型冠状病毒相关实验室检测的生物安全指南(试行diyi版)--中华医学会检验分会

3. 流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南--2011版卫生部行业标准

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